蒽酮定糖相對標准偏差不超過多少

① 蒽酮比色法的蒽酮比色法測定多糖含量

[a]多糖含有幾百個或更多殘基，但只有一個還原基團，因此它的還原能力極弱，對於他們的測定，應先將它們用酸水解成單糖組分。
蒽酮比色法是一種快速而簡便的定糖方法，糖類遇濃硫酸脫水生成糠醛及其衍生物，該衍生物與蒽酮發生反應，反應後溶液呈藍綠色，於620nm處有最大吸收。因此可用此方法測定多糖含量。
[b]試劑
2g/L蒽酮試劑：溶解2g蒽酮於1L濃硫酸（98%的濃硫酸）中，當日配製使用。
0.01g/L葡萄糖溶液（可加幾滴甲苯作防腐劑）
0.1g/L糖元溶液
[c]實驗器材
試管及試管架 吸量管（1ml，5ml) 恆溫水浴箱（100℃） 製冰機 紫外分光光度計 滴管 白瓷板
製作標准曲線
准確稱取0.1g葡萄糖（分析純），溶解並用蒸餾水定容至100ml後，分別取出1ml,2ml,3ml,4ml,5ml分別加入到50的容量瓶中，並用蒸餾水定容到50ml，配成濃度分別為20ug/ml,40ug/ml,60ug/ml,80ug/ml,100ug/ml,各取1ml於試管中，再加入3ml的蒽酮試劑，迅速浸入冰水中冷卻，待幾支試管均勻加完後，一起浸入100℃恆溫水浴箱中，為防止水分蒸發，應在試管口上加蓋一個玻璃球或者加一個塞子，自溫度重新升至100℃起計時，准確保溫10min後取出，用流動水冷卻，然後，於室溫中平衡片刻（約10min左右），在分光光度計上，波長620nm處，用0.5cm厚度的比色杯，以空白管做對照空白（此處的空白是指不加葡萄糖的蒽酮試劑，其他反應條件都一致），進行比色。
既得標准曲線。
如下表格 編號123456體積ml1（蒸餾水）11111濃度ug/ml020406080100 [d]樣品測定
如上述條件一致，但要記得用除去蛋白質的樣品溶液進行測定，否則會影響測定結果。
樣品含糖量計算：
C×V2×D
樣品含糖量（%）=----------------------×100%
W×V1×10
其中C----在標准曲線上查出的糖含量（ug),
V2---提取液總體積（ml）
V1---測定時取用體積（ml）
D-----稀釋倍數
W-----樣品重量（g）
10-----樣品重量單位g換算成ug的倍數
注意事項：
1.一定要注意溫度要控制在100℃
2.從100℃開始准確計時10min,然後迅速冷卻，於室溫中平衡10min.
3.蒽酮要注意避光保存。配置好的蒽酮試劑也應注意避光，當天配製好的當天使用。
4.試管要保證乾燥清潔，無殘留水滴。

② 用蒽酮比色定糖法時為什麼會出現渾濁，沉澱現象

由於在配置蒽酮試劑的時候是採用了80%的硫酸作為溶劑，二蒽酮是很難溶於水的！在操作過程中，一切使蒽酮試劑被稀釋的不當操作都會導致未與糖溶液融合前蒽酮析出，所以在之後的操作中蒽酮便無法溶於溶劑，便會出現渾濁！舉個例子：在加入蒽酮試劑的時候若使蒽酮沿著粘有水的試管壁流下時便會導致蒽酮試劑被稀釋，這時在往後的操作中便會出現渾濁現象

③ 蒽酮比色法測可溶性糖注意事項

注意事項如下：

1.顯色反應非常靈敏。不要在溶液中混合紙屑和灰塵。

2.H2SO4應為高純度。

3.不同糖和蒽酮的顯色性和穩定性不同。

④ 蒽酮比色法測定可溶性糖

糖在濃硫酸作用下，可經脫水反應生成糖醛，生成的糖醛或羥甲基糖醛可與蒽酮反應生成藍綠色糖醛衍生物在定范圍內，顏色的深淺與糖的含量成正比。糖類與蒽酮反應生成的有色物質，在可見光風的吸收峰為630nm,可在此波長下進行比色，故可用於糖的定量。

半乳糖糖醛

這里介紹的是蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再與蒽酮作用，形成一種綠色的絡合物，顏色的深淺與糖含量有關。方法簡便，但沒有志一性，對於絕大部分的碳水化合物都能與蒽酮反應，產生顏色。

⑤ 定性測定糖的方法都有哪些

【實驗原理】
本實驗採用蒽酮比色法測定可溶性糖的含量.糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再與蒽酮作用形成綠色絡合物,顏色的深淺與糖含量有關.在625 nm波長下的OD值與糖含量成正比.由於蒽酮試劑與糖反應的呈色強度隨時間變化,故必須在反應後立即在同一時間內比色.該實驗方法簡便,但沒有專一性,絕大部分的碳水化合物都能與蒽酮試劑反應,產生顏色.
【器材與試劑】
1. 實驗儀器分光光度計,恆溫水浴,電子天平,烘箱,刻度試管,漏斗
2. 實驗試劑活性炭,乙醇
葡萄糖標准液：稱取已在80℃烘箱中烘至恆重的葡萄糖100
mg,用80%乙醇配製成1000 ml溶液,即得每ml含糖為100
μg的標准液
蒽酮試劑：稱取1 g
蒽酮,溶解於1000 ml稀硫酸（將760 ml相對密度為1.84的濃硫酸用蒸餾水稀釋成1000
ml）溶液中,置於棕色瓶中,當日配置使用.
3. 實驗材料植物葉片或種子
【實驗步驟】
1.
可溶性糖的提取
植物葉片或種子在110℃烘箱烘15
min,然後調至70℃過夜.干葉片磨碎後稱取50 mg樣品倒入10
ml刻度離心管內加入4 ml 80%乙醇,置於80℃水浴中不斷攪拌40
min,離心,收集上清液,其殘渣加2 ml 80%乙醇重復提2次,合並上清液.在上清液中加10
mg活性炭,80℃脫色30 min,80%乙醇定容至10
ml,過濾後取濾液測定.
2.
繪制標准曲線
取20 ml帶塞試管,編號,按下表配置系列濃度的標准葡萄糖溶液.然後在每隻試管中加入5
ml蒽酮試劑,混勻,蓋上塞子,在沸水浴中煮沸10
min（水浴重沸後計時）,取出,立即用水冷卻至室溫,在625nm波長下,分別測量各管的光密度值,用0號管調零.以光密度為縱坐標,葡萄糖含量為橫坐標,繪制標准曲線.

⑥ 求硫酸蒽酮法測總糖含量的具體實驗方法

蒽酮比色法是一種快速而簡便的定糖方法，糖類遇濃硫酸脫水生成糠醛及其衍生物因此可用此方法測定多糖含量。它的精確度不如DNS法高。 那不是的 明白它的

⑦ 求助]多糖含量測定中稀釋因素的計算辦法

結果計算 (m1-m2)×V1×V3×V5 X= —————————— m3×V2×V4×V6式中 X—樣品中粗多糖含量（以葡聚糖計）（mg/g）；m1—樣品測定液中葡聚糖的質量（mg）； m2—樣品空白液中葡聚糖質量（mg）； m3—樣品質量（g）； V1 —樣品提取液總體（mL）； V2—沉澱粗多糖所用樣品提取液體積（mL）； V3 —粗多糖溶液體積（mL）： V4—沉澱葡聚糖所用粗多糖溶液體積（mL）； V5—樣品測定液總體積（mL）： V6—測定用樣品測定溶液體積（mL）。 6、准確度與精密度在不同食品中進行不同濃度的加標回收實驗，回收率為87.8%~110.87%，不同實驗室對同一樣品進行10次測定結果的相對標准偏差為5.8%。

⑧ 蒽酮比色法測定血糖含量

蒽酮比色法是一個快速而簡便的定糖方法。蒽酮可以與游離的已糖或多糖中的已糖基、戊糖基及已糖醛酸起反應，反應後溶液呈藍綠色，在620nm處有最大吸收。本法多用於測定糖原的含量，也可用於測定葡萄糖的含量。
血糖檢測一般不用此法，常用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法測定，相較於蒽酮比色法：標本用量少（一般為5--10ul），操作簡單，不需要沸水浴，恆溫37度即可，便於自動化分析。提交修改

⑨ 生化實驗中 用蒽酮比色法測含糖量時應注意什麼 為什麼

1、該顯色反應非常靈敏，溶液中切勿混入紙屑及塵埃。
2、 H2SO4要用高純度的。
3、不同糖類與蒽酮的顯色有差異，穩定性也不同。
4. 一定要注意溫度要控制在100℃，從100℃開始准確計時10min,然後迅速冷卻，於室溫中平衡10min.加熱、比色時間應嚴格掌握。
5.蒽酮要注意避光保存。配置好的蒽酮試劑也應注意避光，當天配製好的當天使用。
6. 試管要保證乾燥清潔，無殘留水滴。

⑩ 蒽酮比色法的蒽酮比色法測糖試驗

一實驗目的掌握蒽酮比色法測糖的原理和方法
二實驗原理蒽酮可以與游離的已糖或多糖中的已糖基、戊糖 基及已糖醛酸起反應，反應後溶液呈藍綠色，在620nm處有最大吸收。
三實驗器材及試劑
馬鈴薯乾粉
可調試移液器或移液管
可見分光光度計（723型）
電子分析天平
水浴鍋
電爐子
蒽酮試劑：取2g蒽酮溶解到80%H2SO4中，以80%H2SO4定容到1000ml，當日配製使用。
標准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）：100mg葡萄糖溶解到蒸餾水中，定容到1000ml備用。
四、操作
1.製作標准曲線
取7支乾燥潔凈的試管，按表1順序加入試劑，進行測定。
以吸光度值為縱坐標，各標准溶液濃度（mg/ml ）為橫坐標作圖得標准曲線。
表1 蒽酮比色法定糖——標准曲線的製作
沸水浴中准確煮沸10min，取出用流水冷卻，室溫放10min,於620nm處比色
葡萄糖濃度（mg/ml）
2.樣品含量的測定
樣品液的製作：
精確稱取馬鈴薯乾粉0.1g置於錐形瓶中—→加入30ml沸水—→沸水浴30min（不時搖動）—→取出，
3000rpm離心10min（或過濾）—→反復洗滌殘渣2次—→合並濾液—→冷卻至室溫—→定容到50ml的錐形瓶中—→再從中取出1ml，再定容到10ml的容量瓶中
樣品液的測定：
（1）取4支試管，按照表2加樣（加蒽酮時需要冰水浴5min冷卻）
表2 蒽酮比色法定糖——樣品的測定
（2）加樣冷卻完成後置沸水中煮沸10min，取出流水冷卻放置10min，620nm處比色測量各管OD值。
（3）以1號試管作為調零管，2、3、4號管的OD值取平均後從標准曲線上查出樣品液相應的含糖量。
3．結果計算：
C×V
w = ————×100%
m，
式中w：糖的質量分數（%）
C：從標准曲線中查出的糖質量分數（mg/ml）
V：樣品稀釋後的體積（ml）
m：樣品的質量（ml）
原理
植物在個體發育的各個時期，代謝活動也發生相應的變化，碳水化合物的代謝也不例外，其含量也隨之發生變化。了解可溶性糖含量的變化，在生理上和實踐上都有重要的意義。這里介紹的是蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再與蒽酮作用，形成一種綠色的絡合物，顏色的深淺與糖含量有關。方法簡便，但沒有志一性，對於絕大部分的碳水化合物都能與蒽酮反應，產生顏色。
儀器葯品
721型分光光度計 分析天平
研缽 恆溫水浴鍋
燒杯 容量瓶
三角燒瓶 大試管
移液管 漏斗
乙醚 草酸鈉
飽和醋酸鉛
葡萄糖標准溶液：稱取已在80℃烘箱中烘至恆重的葡萄糖100mg，配製成500ml溶液，即得每ml含糖為200μg的標准溶液。
蒽酮試劑：稱取1g經過純化的蒽酮，溶解於1000ml稀硫酸中即得。硫酸溶液由760ml濃硫酸（比重1.84)稀釋成1000ml而成。
操作步驟
1．可溶性糖的提取
稱取重約5g的新鮮植物葉子，於研缽中乙醚少許，仔細研磨成均勻的漿狀物，倒入燒杯中，用70℃熱水洗滌研缽，洗液並入燒杯中，再加蒸鎦水30─40ml。將燒杯放在水浴鍋中加熱，保持溫度70─80℃約半小時，冷卻後1滴1滴地加入飽和中性醋酸鉛，以除去蛋白質，直至加入醋酸鉛時不再形成白色沉澱為止。然後將此混合物連同殘渣一並洗入100ml容量瓶中，加水至刻度，充分振盪。以乾燥漏斗將濾液過濾於一乾燥的三角燒瓶中，瓶中事先放有少量（約0.2─0.4g）草酸鈉粉末，以除去濾液中過量的醋酸鉛，使生成草酸鉛沉澱，再行過濾，所得的透明濾液即為可溶性糖提取液。
2．顯色及比色
吸取上述糖提取液1ml，放入一干潔的試管中，加蒽酮試劑5ml混合之，於沸水浴中煮沸10分鍾，取出冷卻，然後於分光光度計上進行測定，波長為625nm，測得吸光度。從標准曲線上查得濾液中的糖含量（或經直線回歸公式計算），然後再行計算樣品中含糖百分數。
3．繪制標准曲線
取標准葡萄糖溶液將其釋成一系列不同濃度的溶液，濃度分別為每ml含糖0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg。按上述方法分別測得其吸光度，然後繪制A026－糖濃度曲線，或進行直線回歸求得直線方程。
4．計算樣品中含糖百分數(% )
設V為植物樣品稀釋後的體積(ml)
C為提取液的含糖量(μg/ml)
W為植物組織鮮重(g)
則得計算式如下： %=C×V/（W×1000000）×100%