内标法定量多少合适

1. 请问一下气相色谱仪的的内标（正丁醇）含量是多少含量多少对测量结果有什么影响

是测酒精含量吧，白酒成份十分复杂，但是掌握其中几个重要成份（乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯等）的含量就可以指导勾酒师控制白酒的品质，同时明了白酒酿造工艺中产生的一些有害物质（甲醇、杂醇油等）的量使白酒产品真正健康。

采用DNP的填充柱，氢火焰离子化检测器检测，乙酸正丁酯为内标物定量白酒中的醇酯的含量。
测定组分：乙醛、甲醇、乙酸乙酯、正丙醇、仲丁醇、乙缩醛、异丁醇、正丁醇、丁酸乙酯、异戊醇、戊酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯。
检测条件：柱温90℃、检测器135℃、汽化室135℃，载气流量30ml/min，采用内标法定量。

在内标法分析中,要求试样中必须不存在内标物,内标物与各组分的色谱峰能彼此分开,并尽量接近预测组分的色谱峰。
内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离
影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：
1、内标物在样品里混合不好；
2、内标物和样品组分之间发生反应，
3、内标物纯度可变等。
对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显着变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠，而色谱固看来也是正常的话，应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是：面积比可变，而峰高比保持相对恒定，

在制作内标标准曲线时应注意什么?

在用内标法做色话定量分析时，先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做重量比和面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致，因此，在制作标准曲线时，不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等)，还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时，各点并不完全落在直线上，此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差，在使用过程中应定期进行单点校正，若所得值与平均值的偏差小于2，曲线仍可使用，若大于2，则应重作曲线，如果曲线在铰短时期内即产生变动，则不宜使用内标法定量。

2. 内标法定量有何优点，它对内标物质有何要求

优点是无影响因子(内标物和测定物误差同时抵消掉),要求有以下几点：
1.内标物的分子结构、性质与待测组分的相似或相近，且在待测组分附近出峰。
2.试样中不存在内标物，且内标物应与试样中各组分完全分离，即在色谱图上内标物单独出峰。
3.内标物应是纯物质或含量准确已知。
4.内标物与试样互溶，且不发生不可逆化学反应。

3. 定量分析中怎样选择内标法或外标法

选与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液，进样得相对校正因子再将内标物加入欲测组分的样品中，进样后测得欲测组分和内标物的定量参。用内标法公式计算即可。 内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测试样和内标物的质量比及其相应的色谱峰面积之比，来计算被测组分的含量。 选择内标物有4要求：1.内标物应是该试样中不存在的纯物质；2.它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；3.加入内标物的量应接近于被测组分；4.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。 内标法的优点是测定的结果较准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。 外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。

4. 什么是内标法，其计算公式是什么

内标法计算公式为f=(As/ms)/(Ar/mr) ，mi=f×Ai/(As/ms) 。

内标法计算按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量进样，记录色谱图，用含对照品和内标物的对照溶液所得色谱峰响应值。

其中As和Ar分别为内标物和对照品的峰面积或峰高，ms和mr分别为加入内标物和对照品的量。再取含有内标物的待测组分溶液进样，记录色谱图，再根据含内标物的待测组分溶液色谱峰响应值。

其中 Ai和As分别为待测物和内标物的峰面积或峰高，ms为加入内标物的量。必要时，再根据稀释倍数、取样量和标示量折算成为标示量的百分含量，或根据稀释倍数和取样量折算成百分含量。

内标法操作注意事项：

当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的待测组分溶液使用同一份内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称取。

采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的已知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去。

它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质，如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等。

色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条件下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。

需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化合物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化合物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则

以上内容参考 网络-内标法

5. 如何选择内标物质以及内标物的加入量

内标物的选择是重要的： a.它应该是试样中不存在的纯物质； b.加入的量应接近于被测组分； c.要求内标物的色谱峰位于被测组分色谱峰附近，或几个被测组分色谱峰的中间，并与这些组分完全分离； d.应注意内标物与欲测组分的物理及物理化学性质（如挥发度，化学结构，极性以及溶解度等）相近.内标物的加入量也应接近试样中待测组分的含量。 内标法是结合了峰面积归一法和外标法的优点的一种方法，它在加入内标后，按峰面积归一法的分析方法进行分析，这就避免了由于进样的一致性及样品歧视效应导致的偶然误差，因而，它的分析精密度也是比较高的，是气相色谱的一种比较理想的定量分析方法。它的弱点是前处理比较复杂，所花费的时间也比较长，同时必须要有合适的标样及内标物才能进行内标法定量分析。对于内标法定量分析来说，内标物的选择是及其重要的。它必须满足如下的条件：
⑵ .内标物与被分析物质的物理化学性质要相似（如：沸点、极性、化学结构等）；
⑵.内标物应能完全溶解于被测样品（或溶剂）中，且不与被测样品起化学反应；
⑶.内标物的出峰位置应该与被分析物质的出峰位置相近，且又不共溢出，目的是为了避免GC的不稳定性所造成的灵敏度的差异；
⑶ .选择合适的内标物加入量，使得内标物和被分析物质二者峰面积的匹配性大于75%，以免由于它们处在不同响应值区域而导致的灵敏度偏差
什么叫内标法怎样选择内标物
内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，按公式求出被测组分在样品中的百分含量。
内标物的选择要求：
1、原样品中不含组分。
2、与待测物保留时间应接近，但不重叠。
3、为高纯度标准物质，或含量已知物质。
4、在给定色谱条件下应具有一定化学稳定性。

6. 脂肪酸组成测定中内标为多少百分比为宜

内标法在色谱分析中是一种常用的定量分析法。它尤其广泛的应用于高压液相色谱中。这种方法可以抵消仪器和过程带来的误差。 将一定量的某种纯物质，作为内标物加入到已知重量的样品中，进行色谱分析，内标物在色谱图上得到分离的峰。根据已知含量的内标物的峰面积和样品的峰面积，计算组分的百分含量。只要主要组分能被分离和能被检测就可使用这个方法，一些次要组分成为重叠峰或者对检测器无响应就可以允许存在。不过，内标物的选择要符合以下要求：（1）内标物的峰与组分峰能完全分离（2）内标物峰在色谱图上出现的位置，最好在欲定量组分峰的邻近位置。如果样品中有几个组分需要定量，并且他们的k’之差别较大，这时就需要用几个内标物来作定量测定。（3）内标物的性质和浓度尽量与预测定峰的接近。（4）内标物是样品中不存在的，与样品各组分、柱填料和移动相不发生化学反应。 根据组分百分含量与其色谱峰面积成正比的关系进行计算：式中，Pi、fi、Ai和Ps、fs、As分别为组分i和内标物的含量百分比、相对校正因子和峰面积。将两式相除，得：假设我们以内标物的相对校正因子作为这些组分相对校正因子的标准，即所有的组分的校正因子都是相对于内标物的，即fs = 1其中是已知的，将组分i的标准物与内标物配成溶液接近的二元混合物，进行色谱分离，将测得峰面积以及已知的浓度代入（8）式中，求得fi，最后根据（7）式计算分析样品中组分i的百分含量。 有（8）式我们还可以看出，对于一定的样品组分和内标物组成的溶液，当内标物在混合溶液中的含量相同时，样品组分在溶液中的含量与组分峰面积和内标物峰面积之比成正比。因此，我们可以将样品组分标准物与内标物之成数分内标物含量相等的、样品组分含量不同的溶液。将他们分别进样后，得到一系列相应的Ai和As。每组Ai/As值对相应的样品组分含量Pi作图，得带一条外推可通过坐标原点的直线。 同时将样品和内标物配制成与上述组分标准物有相同内标物含量的溶液，在相同的操作条件进样后，从色谱图上得到此溶液中组分i与内标物s的峰面积比Ai/As。将其与上述方法绘制的标准校正曲线作对照，从与此Ai/As相对应的点即可求得组分i在样品中的含量。 内标法特别适用于只需要比较准确的测定样品中一两个峰的情况。结果小心地测定校正因子或绘制标准校正曲线，这个方法的精密度最好可达0.1%。 这个方法的不足之处是增加了一个内标物，是分离的难度增大，对于组成复杂的样品，分离更为困难。另外，每次测定都需要准确的称量，操作麻烦，难以适应快速的中间控制分析。 内标法亦可用峰高进行计算，但与外标法一样，要求操作条件十分稳定

7. 使用内标法定量分析单乙醇胺时，所需的内标物是什么

一般选择内标满足以下依据：
1.内标物与被分析物质的物理化学性质要相似（如：沸点、极性、化学结构等）；
2.内标物应是该试样中不存在的纯物质；
3.它必须完全溶于被测样品（或溶剂）中，且不与被测样品起化学反应；并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；
4.能加入内标物的量应接近于被测组分；
5.色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。且又不共溢出，目的是为了避免仪器的不稳定性所造成的灵敏度的差异；
6.选择合适的内标物加入量，使得内标物和被分析物质二者峰面积的匹配性大于75%，以免由于它们处在不同响应值区域而导致的灵敏度偏差。

8. 内标法定量有何优点，它对内标物质有何要求

优点：
1.
在色谱柱不超载的范围内，定量结果与进样量重复性无关
2.
只要被测物质和内标物出峰，且能完全分离就可定量，与其他组分无关;能避免实验前处理操作中的目标成分丢失造成的定量不准确。
对内标物质的要求：
1.
原样品中不含组分
2.
与待测物保留时间应接近,但不重叠
3.
为高纯度标准物质，或含量已知物质
4.
在给定色谱条件下具有一定化学稳定性
影响内标法的因素：
影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。
由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。
化学方面的因素包括：
1、内标物在样品里混合不好；
2、内标物和样品组分之间发生反应，
3、内标物纯度可变等。
参考资料
网络.网络[引用时间2018-4-10]

9. 简述气相色谱中归一化法和内标法定量的优缺点，它们各适用于什么情况

1、归一化法

优点：操作方便，程序固定。

缺点：归一化法要求样品条件较高，要求样品中所有组分均出峰且要求所有组分的标准品才能定量，故很少采用。

范围：适合样品中各组分都能流出色谱柱，并能在色谱图中出峰，比较适合工厂定量样品组成，如果需要减少误差，可以用修正面积归一法。

2、内标法

优点：定量准确，精度最高，对操作条件要求不高。内标物要分别加入到标准样品和求知样品中，这样可抵消由于操作条件（包括进样量）的波动带来的误差。内标法只要求待测组分出峰或完全分离即可，其余组分则可用快速升高柱温使其流出或用反吹法将其放空，缩短了分析时间。

缺点：内标物选择困难。

范围：当样品的所有组分不能全部流出色谱柱时，或检测器不能对每个组分都产生信号，或者只需要测定样品中某几个组分含量时，可采用内标法。

(9)内标法定量多少合适扩展阅读

除了内标法和归一化法，常用的气相色谱方法还有外标法。

与内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。

外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。

外标要求仪器重复性很严格，适于大量的分析样品，因为仪器随着使用会有所变化，因此需要定期进行曲线校正。 此法的特点是操作简单，计算方便，不需测量校正因子，适于自动分析。但仪器的重现性和操作条件的稳定性必须保证，否则，会影响实验结果。