蒽酮定糖相对标准偏差不超过多少

① 蒽酮比色法的蒽酮比色法测定多糖含量

[a]多糖含有几百个或更多残基，但只有一个还原基团，因此它的还原能力极弱，对于他们的测定，应先将它们用酸水解成单糖组分。
蒽酮比色法是一种快速而简便的定糖方法，糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛及其衍生物，该衍生物与蒽酮发生反应，反应后溶液呈蓝绿色，于620nm处有最大吸收。因此可用此方法测定多糖含量。
[b]试剂
2g/L蒽酮试剂：溶解2g蒽酮于1L浓硫酸（98%的浓硫酸）中，当日配制使用。
0.01g/L葡萄糖溶液（可加几滴甲苯作防腐剂）
0.1g/L糖元溶液
[c]实验器材
试管及试管架 吸量管（1ml，5ml) 恒温水浴箱（100℃） 制冰机 紫外分光光度计 滴管 白瓷板
制作标准曲线
准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容至100ml后，分别取出1ml,2ml,3ml,4ml,5ml分别加入到50的容量瓶中，并用蒸馏水定容到50ml，配成浓度分别为20ug/ml,40ug/ml,60ug/ml,80ug/ml,100ug/ml,各取1ml于试管中，再加入3ml的蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几支试管均匀加完后，一起浸入100℃恒温水浴箱中，为防止水分蒸发，应在试管口上加盖一个玻璃球或者加一个塞子，自温度重新升至100℃起计时，准确保温10min后取出，用流动水冷却，然后，于室温中平衡片刻（约10min左右），在分光光度计上，波长620nm处，用0.5cm厚度的比色杯，以空白管做对照空白（此处的空白是指不加葡萄糖的蒽酮试剂，其他反应条件都一致），进行比色。
既得标准曲线。
如下表格 编号123456体积ml1（蒸馏水）11111浓度ug/ml020406080100 [d]样品测定
如上述条件一致，但要记得用除去蛋白质的样品溶液进行测定，否则会影响测定结果。
样品含糖量计算：
C×V2×D
样品含糖量（%）=----------------------×100%
W×V1×10
其中C----在标准曲线上查出的糖含量（ug),
V2---提取液总体积（ml）
V1---测定时取用体积（ml）
D-----稀释倍数
W-----样品重量（g）
10-----样品重量单位g换算成ug的倍数
注意事项：
1.一定要注意温度要控制在100℃
2.从100℃开始准确计时10min,然后迅速冷却，于室温中平衡10min.
3.蒽酮要注意避光保存。配置好的蒽酮试剂也应注意避光，当天配制好的当天使用。
4.试管要保证干燥清洁，无残留水滴。

② 用蒽酮比色定糖法时为什么会出现浑浊，沉淀现象

由于在配置蒽酮试剂的时候是采用了80%的硫酸作为溶剂，二蒽酮是很难溶于水的！在操作过程中，一切使蒽酮试剂被稀释的不当操作都会导致未与糖溶液融合前蒽酮析出，所以在之后的操作中蒽酮便无法溶于溶剂，便会出现浑浊！举个例子：在加入蒽酮试剂的时候若使蒽酮沿着粘有水的试管壁流下时便会导致蒽酮试剂被稀释，这时在往后的操作中便会出现浑浊现象

③ 蒽酮比色法测可溶性糖注意事项

注意事项如下：

1.显色反应非常灵敏。不要在溶液中混合纸屑和灰尘。

2.H2SO4应为高纯度。

3.不同糖和蒽酮的显色性和稳定性不同。

④ 蒽酮比色法测定可溶性糖

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物在定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光风的吸收峰为630nm,可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。

半乳糖糖醛

这里介绍的是蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物，颜色的深浅与糖含量有关。方法简便，但没有志一性，对于绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应，产生颜色。

⑤ 定性测定糖的方法都有哪些

【实验原理】
本实验采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量.糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物,颜色的深浅与糖含量有关.在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比.由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色.该实验方法简便,但没有专一性,绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮试剂反应,产生颜色.
【器材与试剂】
1. 实验仪器分光光度计,恒温水浴,电子天平,烘箱,刻度试管,漏斗
2. 实验试剂活性炭,乙醇
葡萄糖标准液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100
mg,用80%乙醇配制成1000 ml溶液,即得每ml含糖为100
μg的标准液
蒽酮试剂：称取1 g
蒽酮,溶解于1000 ml稀硫酸（将760 ml相对密度为1.84的浓硫酸用蒸馏水稀释成1000
ml）溶液中,置于棕色瓶中,当日配置使用.
3. 实验材料植物叶片或种子
【实验步骤】
1.
可溶性糖的提取
植物叶片或种子在110℃烘箱烘15
min,然后调至70℃过夜.干叶片磨碎后称取50 mg样品倒入10
ml刻度离心管内加入4 ml 80%乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40
min,离心,收集上清液,其残渣加2 ml 80%乙醇重复提2次,合并上清液.在上清液中加10
mg活性炭,80℃脱色30 min,80%乙醇定容至10
ml,过滤后取滤液测定.
2.
绘制标准曲线
取20 ml带塞试管,编号,按下表配置系列浓度的标准葡萄糖溶液.然后在每只试管中加入5
ml蒽酮试剂,混匀,盖上塞子,在沸水浴中煮沸10
min（水浴重沸后计时）,取出,立即用水冷却至室温,在625nm波长下,分别测量各管的光密度值,用0号管调零.以光密度为纵坐标,葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线.

⑥ 求硫酸蒽酮法测总糖含量的具体实验方法

蒽酮比色法是一种快速而简便的定糖方法，糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛及其衍生物因此可用此方法测定多糖含量。它的精确度不如DNS法高。 那不是的 明白它的

⑦ 求助]多糖含量测定中稀释因素的计算办法

结果计算 (m1-m2)×V1×V3×V5 X= —————————— m3×V2×V4×V6式中 X—样品中粗多糖含量（以葡聚糖计）（mg/g）；m1—样品测定液中葡聚糖的质量（mg）； m2—样品空白液中葡聚糖质量（mg）； m3—样品质量（g）； V1 —样品提取液总体（mL）； V2—沉淀粗多糖所用样品提取液体积（mL）； V3 —粗多糖溶液体积（mL）： V4—沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积（mL）； V5—样品测定液总体积（mL）： V6—测定用样品测定溶液体积（mL）。 6、准确度与精密度在不同食品中进行不同浓度的加标回收实验，回收率为87.8%~110.87%，不同实验室对同一样品进行10次测定结果的相对标准偏差为5.8%。

⑧ 蒽酮比色法测定血糖含量

蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。蒽酮可以与游离的已糖或多糖中的已糖基、戊糖基及已糖醛酸起反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有最大吸收。本法多用于测定糖原的含量，也可用于测定葡萄糖的含量。
血糖检测一般不用此法，常用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法测定，相较于蒽酮比色法：标本用量少（一般为5--10ul），操作简单，不需要沸水浴，恒温37度即可，便于自动化分析。提交修改

⑨ 生化实验中 用蒽酮比色法测含糖量时应注意什么 为什么

1、该显色反应非常灵敏，溶液中切勿混入纸屑及尘埃。
2、 H2SO4要用高纯度的。
3、不同糖类与蒽酮的显色有差异，稳定性也不同。
4. 一定要注意温度要控制在100℃，从100℃开始准确计时10min,然后迅速冷却，于室温中平衡10min.加热、比色时间应严格掌握。
5.蒽酮要注意避光保存。配置好的蒽酮试剂也应注意避光，当天配制好的当天使用。
6. 试管要保证干燥清洁，无残留水滴。

⑩ 蒽酮比色法的蒽酮比色法测糖试验

一实验目的掌握蒽酮比色法测糖的原理和方法
二实验原理蒽酮可以与游离的已糖或多糖中的已糖基、戊糖 基及已糖醛酸起反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有最大吸收。
三实验器材及试剂
马铃薯干粉
可调试移液器或移液管
可见分光光度计（723型）
电子分析天平
水浴锅
电炉子
蒽酮试剂：取2g蒽酮溶解到80%H2SO4中，以80%H2SO4定容到1000ml，当日配制使用。
标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）：100mg葡萄糖溶解到蒸馏水中，定容到1000ml备用。
四、操作
1.制作标准曲线
取7支干燥洁净的试管，按表1顺序加入试剂，进行测定。
以吸光度值为纵坐标，各标准溶液浓度（mg/ml ）为横坐标作图得标准曲线。
表1 蒽酮比色法定糖——标准曲线的制作
沸水浴中准确煮沸10min，取出用流水冷却，室温放10min,于620nm处比色
葡萄糖浓度（mg/ml）
2.样品含量的测定
样品液的制作：
精确称取马铃薯干粉0.1g置于锥形瓶中—→加入30ml沸水—→沸水浴30min（不时摇动）—→取出，
3000rpm离心10min（或过滤）—→反复洗涤残渣2次—→合并滤液—→冷却至室温—→定容到50ml的锥形瓶中—→再从中取出1ml，再定容到10ml的容量瓶中
样品液的测定：
（1）取4支试管，按照表2加样（加蒽酮时需要冰水浴5min冷却）
表2 蒽酮比色法定糖——样品的测定
（2）加样冷却完成后置沸水中煮沸10min，取出流水冷却放置10min，620nm处比色测量各管OD值。
（3）以1号试管作为调零管，2、3、4号管的OD值取平均后从标准曲线上查出样品液相应的含糖量。
3．结果计算：
C×V
w = ————×100%
m，
式中w：糖的质量分数（%）
C：从标准曲线中查出的糖质量分数（mg/ml）
V：样品稀释后的体积（ml）
m：样品的质量（ml）
原理
植物在个体发育的各个时期，代谢活动也发生相应的变化，碳水化合物的代谢也不例外，其含量也随之发生变化。了解可溶性糖含量的变化，在生理上和实践上都有重要的意义。这里介绍的是蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物，颜色的深浅与糖含量有关。方法简便，但没有志一性，对于绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应，产生颜色。
仪器药品
721型分光光度计 分析天平
研钵 恒温水浴锅
烧杯 容量瓶
三角烧瓶 大试管
移液管 漏斗
乙醚 草酸钠
饱和醋酸铅
葡萄糖标准溶液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg，配制成500ml溶液，即得每ml含糖为200μg的标准溶液。
蒽酮试剂：称取1g经过纯化的蒽酮，溶解于1000ml稀硫酸中即得。硫酸溶液由760ml浓硫酸（比重1.84)稀释成1000ml而成。
操作步骤
1．可溶性糖的提取
称取重约5g的新鲜植物叶子，于研钵中乙醚少许，仔细研磨成均匀的浆状物，倒入烧杯中，用70℃热水洗涤研钵，洗液并入烧杯中，再加蒸镏水30─40ml。将烧杯放在水浴锅中加热，保持温度70─80℃约半小时，冷却后1滴1滴地加入饱和中性醋酸铅，以除去蛋白质，直至加入醋酸铅时不再形成白色沉淀为止。然后将此混合物连同残渣一并洗入100ml容量瓶中，加水至刻度，充分振荡。以干燥漏斗将滤液过滤于一干燥的三角烧瓶中，瓶中事先放有少量（约0.2─0.4g）草酸钠粉末，以除去滤液中过量的醋酸铅，使生成草酸铅沉淀，再行过滤，所得的透明滤液即为可溶性糖提取液。
2．显色及比色
吸取上述糖提取液1ml，放入一干洁的试管中，加蒽酮试剂5ml混合之，于沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，然后于分光光度计上进行测定，波长为625nm，测得吸光度。从标准曲线上查得滤液中的糖含量（或经直线回归公式计算），然后再行计算样品中含糖百分数。
3．绘制标准曲线
取标准葡萄糖溶液将其释成一系列不同浓度的溶液，浓度分别为每ml含糖0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg。按上述方法分别测得其吸光度，然后绘制A026－糖浓度曲线，或进行直线回归求得直线方程。
4．计算样品中含糖百分数(% )
设V为植物样品稀释后的体积(ml)
C为提取液的含糖量(μg/ml)
W为植物组织鲜重(g)
则得计算式如下： %=C×V/（W×1000000）×100%