內標法定量多少合適

1. 請問一下氣相色譜儀的的內標（正丁醇）含量是多少含量多少對測量結果有什麼影響

是測酒精含量吧，白酒成份十分復雜，但是掌握其中幾個重要成份（乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯等）的含量就可以指導勾酒師控制白酒的品質，同時明了白酒釀造工藝中產生的一些有害物質（甲醇、雜醇油等）的量使白酒產品真正健康。

採用DNP的填充柱，氫火焰離子化檢測器檢測，乙酸正丁酯為內標物定量白酒中的醇酯的含量。
測定組分：乙醛、甲醇、乙酸乙酯、正丙醇、仲丁醇、乙縮醛、異丁醇、正丁醇、丁酸乙酯、異戊醇、戊酸乙酯、乳酸乙酯、己酸乙酯。
檢測條件：柱溫90℃、檢測器135℃、汽化室135℃，載氣流量30ml/min，採用內標法定量。

在內標法分析中,要求試樣中必須不存在內標物,內標物與各組分的色譜峰能彼此分開,並盡量接近預測組分的色譜峰。
內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出於操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的准確度。
內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標准物質，它可被色譜拄所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測定內標物和待測組分的峰面積與相對響應值，即可求出待測組分在樣品中的百分含量。採用內標法定量時，內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說，內標物應當是一個能得到純樣的己知化合物，這樣它能以准確、已知的量加到樣品中去，它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特徵，最好是被分析物質的一個同系物。當然，在色譜分析條什下，內標物必須能與樣品中各組分充分分離
影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。
由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現。
化學方面的因素包括：
1、內標物在樣品里混合不好；
2、內標物和樣品組分之間發生反應，
3、內標物純度可變等。
對於一個比較成熟的方法來說，色譜方面的問題發生的可能性更大一些，色譜上常見的一些問題(如滲漏)對絕對面積的影響比較大，對面積比的影響則要小一些，但如果絕對面積的變化已大到足以使面積比發生顯著變化的程度，那麼一定有某個重要的色譜問題存在，比如進樣量改變太大，樣品組分濃度和內標濃度之間有很大的差別，檢測器非線性等。進樣量應足夠小並保持不變，這樣才不致於造成檢測器和積分裝置飽和。如果認為方法比較可靠，而色譜固看來也是正常的話，應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發生懷疑的最有力的證據是：面積比可變，而峰高比保持相對恆定，

在製作內標標准曲線時應注意什麼?

在用內標法做色話定量分析時，先配製一定重量比的被測組分和內標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關系曲線，此曲線即為標准曲線。在實際樣品分析時所採用的色譜條件應盡可能與製作標准曲線時所用的條件一致，因此，在製作標准曲線時，不僅要註明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等)，還應註明進樣體積和內標物濃度。在製作內標標准曲線時，各點並不完全落在直線上，此時應求出面積比和重量比的比值與其平均位的標准偏差，在使用過程中應定期進行單點校正，若所得值與平均值的偏差小於2，曲線仍可使用，若大於2，則應重作曲線，如果曲線在鉸短時期內即產生變動，則不宜使用內標法定量。

2. 內標法定量有何優點，它對內標物質有何要求

優點是無影響因子(內標物和測定物誤差同時抵消掉),要求有以下幾點：
1.內標物的分子結構、性質與待測組分的相似或相近，且在待測組分附近出峰。
2.試樣中不存在內標物，且內標物應與試樣中各組分完全分離，即在色譜圖上內標物單獨出峰。
3.內標物應是純物質或含量准確已知。
4.內標物與試樣互溶，且不發生不可逆化學反應。

3. 定量分析中怎樣選擇內標法或外標法

選與欲測組分相近但能完全分離的組分做內標物（當然是樣品中沒有的組分），然後配製欲測組分和內標物的混合標准溶液，進樣得相對校正因子再將內標物加入欲測組分的樣品中，進樣後測得欲測組分和內標物的定量參。用內標法公式計算即可。 內標法是將一定量的純物質作內標物，加入到准確稱量的試樣中，根據被測試樣和內標物的質量比及其相應的色譜峰面積之比，來計算被測組分的含量。 選擇內標物有4要求：1.內標物應是該試樣中不存在的純物質；2.它必須完全溶於試樣中，並與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；3.加入內標物的量應接近於被測組分；4.色譜峰的位置應與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。 內標法的優點是測定的結果較准確，由於通過測量內標物及被測組分的峰面積的相對值來進行計算的，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內標法的缺點是操作程序較為麻煩，每次分析時內標物和試樣都要准確稱量，有時尋找合適的內標物也有困難。 外標法簡便，但進樣量要求十分准確，要嚴格控制在與標准物相同的操作條件下進行，否則造成分析誤差，得不到准確的測量結果。

4. 什麼是內標法，其計算公式是什麼

內標法計算公式為f=(As/ms)/(Ar/mr) ，mi=f×Ai/(As/ms) 。

內標法計算按各品種項下的規定，精密稱（量）取對照品和內標物，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量進樣，記錄色譜圖，用含對照品和內標物的對照溶液所得色譜峰響應值。

其中As和Ar分別為內標物和對照品的峰面積或峰高，ms和mr分別為加入內標物和對照品的量。再取含有內標物的待測組分溶液進樣，記錄色譜圖，再根據含內標物的待測組分溶液色譜峰響應值。

其中 Ai和As分別為待測物和內標物的峰面積或峰高，ms為加入內標物的量。必要時，再根據稀釋倍數、取樣量和標示量折算成為標示量的百分含量，或根據稀釋倍數和取樣量折算成百分含量。

內標法操作注意事項：

當配製校正因子測定用的對照溶液和含有內標物質的待測組分溶液使用同一份內標物質溶液時，則配製內標物質溶液不必精密稱取。

採用內標法定量時，內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說，內標物應當是一個能得到純樣的已知化合物，這樣它能以准確、已知的量加到樣品中去。

它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質，如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等。

色譜行為和響應特徵，最好是被分析物質的一個同系物。當然，在色譜分析條件下，內標物必須能與樣品中各組分充分分離。

需要指出的是，在少數情況下，分析人員可能比較關心化合物在一個復雜過程中所得到的回收率，此時，他可以使用一種在這種過程中很容易被完全回收的化合物作內標，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則

以上內容參考 網路-內標法

5. 如何選擇內標物質以及內標物的加入量

內標物的選擇是重要的： a.它應該是試樣中不存在的純物質； b.加入的量應接近於被測組分； c.要求內標物的色譜峰位於被測組分色譜峰附近，或幾個被測組分色譜峰的中間，並與這些組分完全分離； d.應注意內標物與欲測組分的物理及物理化學性質（如揮發度，化學結構，極性以及溶解度等）相近.內標物的加入量也應接近試樣中待測組分的含量。 內標法是結合了峰面積歸一法和外標法的優點的一種方法，它在加入內標後，按峰面積歸一法的分析方法進行分析，這就避免了由於進樣的一致性及樣品歧視效應導致的偶然誤差，因而，它的分析精密度也是比較高的，是氣相色譜的一種比較理想的定量分析方法。它的弱點是前處理比較復雜，所花費的時間也比較長，同時必須要有合適的標樣及內標物才能進行內標法定量分析。對於內標法定量分析來說，內標物的選擇是及其重要的。它必須滿足如下的條件：
⑵ .內標物與被分析物質的物理化學性質要相似（如：沸點、極性、化學結構等）；
⑵.內標物應能完全溶解於被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學反應；
⑶.內標物的出峰位置應該與被分析物質的出峰位置相近，且又不共溢出，目的是為了避免GC的不穩定性所造成的靈敏度的差異；
⑶ .選擇合適的內標物加入量，使得內標物和被分析物質二者峰面積的匹配性大於75%，以免由於它們處在不同響應值區域而導致的靈敏度偏差
什麼叫內標法怎樣選擇內標物
內標法是將一定重量的純物質作為內標物加到一定量的被分析樣品混合物中，然後對含有內標物的樣品進行色譜分析，分別測定內標物和待測組分的峰面積及相對校正因子，按公式求出被測組分在樣品中的百分含量。
內標物的選擇要求：
1、原樣品中不含組分。
2、與待測物保留時間應接近，但不重疊。
3、為高純度標准物質，或含量已知物質。
4、在給定色譜條件下應具有一定化學穩定性。

6. 脂肪酸組成測定中內標為多少百分比為宜

內標法在色譜分析中是一種常用的定量分析法。它尤其廣泛的應用於高壓液相色譜中。這種方法可以抵消儀器和過程帶來的誤差。 將一定量的某種純物質，作為內標物加入到已知重量的樣品中，進行色譜分析，內標物在色譜圖上得到分離的峰。根據已知含量的內標物的峰面積和樣品的峰面積，計算組分的百分含量。只要主要組分能被分離和能被檢測就可使用這個方法，一些次要組分成為重疊峰或者對檢測器無響應就可以允許存在。不過，內標物的選擇要符合以下要求：（1）內標物的峰與組分峰能完全分離（2）內標物峰在色譜圖上出現的位置，最好在欲定量組分峰的鄰近位置。如果樣品中有幾個組分需要定量，並且他們的k』之差別較大，這時就需要用幾個內標物來作定量測定。（3）內標物的性質和濃度盡量與預測定峰的接近。（4）內標物是樣品中不存在的，與樣品各組分、柱填料和移動相不發生化學反應。 根據組分百分含量與其色譜峰面積成正比的關系進行計算：式中，Pi、fi、Ai和Ps、fs、As分別為組分i和內標物的含量百分比、相對校正因子和峰面積。將兩式相除，得：假設我們以內標物的相對校正因子作為這些組分相對校正因子的標准，即所有的組分的校正因子都是相對於內標物的，即fs = 1其中是已知的，將組分i的標准物與內標物配成溶液接近的二元混合物，進行色譜分離，將測得峰面積以及已知的濃度代入（8）式中，求得fi，最後根據（7）式計算分析樣品中組分i的百分含量。 有（8）式我們還可以看出，對於一定的樣品組分和內標物組成的溶液，當內標物在混合溶液中的含量相同時，樣品組分在溶液中的含量與組分峰面積和內標物峰面積之比成正比。因此，我們可以將樣品組分標准物與內標物之成數分內標物含量相等的、樣品組分含量不同的溶液。將他們分別進樣後，得到一系列相應的Ai和As。每組Ai/As值對相應的樣品組分含量Pi作圖，得帶一條外推可通過坐標原點的直線。 同時將樣品和內標物配製成與上述組分標准物有相同內標物含量的溶液，在相同的操作條件進樣後，從色譜圖上得到此溶液中組分i與內標物s的峰面積比Ai/As。將其與上述方法繪制的標准校正曲線作對照，從與此Ai/As相對應的點即可求得組分i在樣品中的含量。 內標法特別適用於只需要比較准確的測定樣品中一兩個峰的情況。結果小心地測定校正因子或繪制標准校正曲線，這個方法的精密度最好可達0.1%。 這個方法的不足之處是增加了一個內標物，是分離的難度增大，對於組成復雜的樣品，分離更為困難。另外，每次測定都需要准確的稱量，操作麻煩，難以適應快速的中間控制分析。 內標法亦可用峰高進行計算，但與外標法一樣，要求操作條件十分穩定

7. 使用內標法定量分析單乙醇胺時，所需的內標物是什麼

一般選擇內標滿足以下依據：
1.內標物與被分析物質的物理化學性質要相似（如：沸點、極性、化學結構等）；
2.內標物應是該試樣中不存在的純物質；
3.它必須完全溶於被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學反應；並與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；
4.能加入內標物的量應接近於被測組分；
5.色譜峰的位置應與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。且又不共溢出，目的是為了避免儀器的不穩定性所造成的靈敏度的差異；
6.選擇合適的內標物加入量，使得內標物和被分析物質二者峰面積的匹配性大於75%，以免由於它們處在不同響應值區域而導致的靈敏度偏差。

8. 內標法定量有何優點，它對內標物質有何要求

優點：
1.
在色譜柱不超載的范圍內，定量結果與進樣量重復性無關
2.
只要被測物質和內標物出峰，且能完全分離就可定量，與其他組分無關;能避免實驗前處理操作中的目標成分丟失造成的定量不準確。
對內標物質的要求：
1.
原樣品中不含組分
2.
與待測物保留時間應接近,但不重疊
3.
為高純度標准物質，或含量已知物質
4.
在給定色譜條件下具有一定化學穩定性
影響內標法的因素：
影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。
由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現。
化學方面的因素包括：
1、內標物在樣品里混合不好；
2、內標物和樣品組分之間發生反應，
3、內標物純度可變等。
參考資料
網路.網路[引用時間2018-4-10]

9. 簡述氣相色譜中歸一化法和內標法定量的優缺點，它們各適用於什麼情況

1、歸一化法

優點：操作方便，程序固定。

缺點：歸一化法要求樣品條件較高，要求樣品中所有組分均出峰且要求所有組分的標准品才能定量，故很少採用。

范圍：適合樣品中各組分都能流出色譜柱，並能在色譜圖中出峰，比較適合工廠定量樣品組成，如果需要減少誤差，可以用修正面積歸一法。

2、內標法

優點：定量准確，精度最高，對操作條件要求不高。內標物要分別加入到標准樣品和求知樣品中，這樣可抵消由於操作條件（包括進樣量）的波動帶來的誤差。內標法只要求待測組分出峰或完全分離即可，其餘組分則可用快速升高柱溫使其流出或用反吹法將其放空，縮短了分析時間。

缺點：內標物選擇困難。

范圍：當樣品的所有組分不能全部流出色譜柱時，或檢測器不能對每個組分都產生信號，或者只需要測定樣品中某幾個組分含量時，可採用內標法。

(9)內標法定量多少合適擴展閱讀

除了內標法和歸一化法，常用的氣相色譜方法還有外標法。

與內標法相比，外標法不是把標准物質加入到被測樣品中，而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定，把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進行比較求得被測組分的含量。

外標物與被測組分同為一種物質但要求它有一定的純度，分析時外標物的濃度應與被測物濃度相接近，以利於定量分析的准確性。

外標要求儀器重復性很嚴格，適於大量的分析樣品，因為儀器隨著使用會有所變化，因此需要定期進行曲線校正。 此法的特點是操作簡單，計算方便，不需測量校正因子，適於自動分析。但儀器的重現性和操作條件的穩定性必須保證，否則，會影響實驗結果。